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雙光束紫外可見分光光度計(jì)的使用及原理

首先稱取一定量的化合物( 當(dāng)分子量在100 ～200 之間時(shí), 通常取1 mg 左右) , 將其溶解在選定的溶劑中, 比如制備100 mL的溶液, 一部分溶液轉(zhuǎn)移到一個(gè)石英樣品池。這個(gè)樣品池可以使得光束穿過(guò)1 cm 厚度的溶液( 這就是式1. 2 中的l) , 相應(yīng)的另一個(gè)裝有純?nèi)軇┑臉悠烦匾矞?zhǔn)備好, 兩個(gè)池分別放在光譜儀的適當(dāng)位置。樣品池是這樣放置的, 它使得兩束相同的紫外或者可見光可以通過(guò), 一束通過(guò)樣品, 而另一束則通過(guò)純的溶劑, 然后透過(guò)光束的強(qiáng)度在儀器的整個(gè)波長(zhǎng)范圍內(nèi)比較。大多數(shù)光譜儀中有兩種光源, 一個(gè)是“ 白”紫外光而另一個(gè)是白可見光, 當(dāng)需要全范圍掃描時(shí), 它們需要變換, 通常可見或者紫外光中的一個(gè)即可以滿足目的。在大多數(shù)儀器中, 光譜被自動(dòng)地在以log10 ( I0 / I) 為縱坐標(biāo)和λ為橫坐標(biāo)的圖上描繪。為了發(fā)表或比較結(jié)果, 坐標(biāo)常變換為ε對(duì)λ或者logε對(duì)λ。λ的單位幾乎都是nm, 嚴(yán)格地說(shuō), 躍遷的強(qiáng)度是用吸收峰下的面積來(lái)測(cè)量( 如果是以ε對(duì)頻率作圖) , 而不是用峰zui大值的強(qiáng)度。但是由于某些原因, zui主要是因?yàn)榉奖?/span>, 以及處理相互重疊的峰時(shí)的困難, 測(cè)量吸收峰zui大值仍是日常的方法。所以光譜用λma x來(lái)表示, 即吸收峰的波長(zhǎng), 以及εm ax , 即由公式1. 2 定義的吸收峰的強(qiáng)度。